当水体污染比较严重的时，水样检测结果超出检测上限时，就需要对水样进行稀释。程控定量封口机采用酶底物法检测方法来检测较脏的地下水或者排污口的水样也需要稀释到100倍甚至1000倍。那么在检测时需要注意些什么呢？
1、实验步骤越少，结果偏差也会越小。所以酶底物法步骤少，会更有优势。
2、在做稀释时，应保证取样量大。譬如10倍稀释：取10ml原液+90ml无菌水配成100ml10倍稀释液①；若是要百倍千倍稀释，则需要进行梯度稀释，由①中的10倍稀释样再取10ml，再加90ml无菌水，此时完成了100倍的稀释。若是千倍稀释，则需要从100倍稀释样中再取10ml进行稀释。
3、每次再去原液时，取样的均匀程度直接影响了后面的稀释结果，故我们在每次取样前必须充分摇匀。
4、为了使数据更加地稳定及接近真实值，建议每个梯度稀释做平行样。这时，我们可以设计成取20ml原液加180ml无菌水配成200ml样或者取30ml加270ml无菌水配成300ml10倍稀释样，以此往下做梯度稀释。若是未知样且浓度可能会很高的时候，我们建议这样去稀释，因为这样我们便可以保证每个梯度至少有一个样。若已经大概了解水样来源及浓度，可直接梯度稀释到我们要的浓度，并做2-3个平行样。
5、对于未知样需要进行浓度的摸索，无论是多管还是酶底物法，都会有较大工作量。前期的梯度稀释及每个梯度做平行样都是无法避免的，当我们后期对水样浓度有了把握后便可以直接稀释到某个浓度，这样就减少许多的工作量了。由于酶底物法是已灭菌可直接用的选择性培养基，比起多管法会更加简便、不用洗大量的管子。另外滤膜法在做脏水时就完全不适合了。
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